本书共分七个部分:基础知识,核酸技术、分子克隆、蛋白技术、生物信息学在分子生物学实验中的应用、综合性实验和附录。
前言
基础知识
章 分子生物学实验室的基本要求
1.1 实验室规则
1.2 实验室安全防护
1.3 放射性同位素防护
1.4 危险化学试剂防护
1.5 生物安全防护
1.6 实验室物品与仪器的管理
第2章 实验记录与实验报告
2.1 实验记录
2.2 实验报告
第3章 仪器使用与溶液配制
3.1 常用仪器设备
3.2 溶液配制
第4章 常用实验用品的处理
4.1 清洗
4.2 消毒灭菌
4.3 液氮的安全使用
第5章 分子生物学实验技术原理
5.1 细胞培养技术
5.2 大肠杆菌的培养与保存
第2篇 核酸技术
第6章 核酸电泳
6.1 琼脂糖凝胶电泳分离DNA
6.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离DNA
第7章 核酸的分离纯化和鉴定
7.1 质粒DNA的提取与纯化
7.2 蛋白酶K和苯酚从哺乳动物细胞中分离高分子质量DNA
7.3 其他DNA提取方案
7.4 RNA的提取
第8章 聚合酶链反应(PCR)
8.1 普通PCR
8.2 RT-PCR
8.3 荧光定量PCR
第9章 核酸分子杂交
9.1 斑点杂交
9.2 原位杂交
9.3 Southern印迹杂交
9.4 Northern印迹杂交
第3篇 分子克隆
**0章 DNA的酶切
10.1 实验目的
10.2 实验原理
10.3 仪器、材料与试剂
10.4 实验流程
10.5 实验步骤
10.6 结果分析
10.7 注意事项
10.8 应用
**1章 DNA的连接
11.1 实验目的
11.2 实验原理
11.3 仪器、材料与试剂
11.4 实验流程
11.5 实验步骤
11.6 结果分析
11.7 注意事项
11.8 应用
**2章 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化
12.1 实验目的
12.2 实验原理
12.3 仪器、材料与试剂
12.4 实验流程
12.5 实验步骤
12.6 结果分析
12.7 注意事项
12.8 应用
**3章 重组子的鉴定
13.1 实验目的
13.2 实验原理
13.3 仪器、材料与试剂
13.4 实验流程
13.5 实验步骤
13.6 结果分析
13.7 注意事项
13.8 应用
第4篇 蛋白技术
**4章 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达
14.1 实验目的
14.2 实验原理
14.3 仪器、材料与试剂
14.4 实验流程
14.5 实验步骤
14.6 结果分析
14.7 注意事项
14.8 应用
14.9 真核细胞表达外源基因操作步骤
**5章 蛋白质的提取与纯化
15.1 实验目的
15.2 实验原理
15.3 仪器与试剂
15.4 实验流程
15.5 实验步骤
15.6 结果分析
15.7 注意事项
15.8 应用
**6章 蛋白质的定量检测
16.1 Lowry法测定蛋白质含量
16.2 BCA法测定蛋白质含量
16.3 Bradford法测定蛋白质含量
**7章 目标蛋白质的测定
17.1 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
17.2 蛋白质的免疫印迹技术(Western-Blot)
17.3 免疫共沉淀
17.4 双向聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质
**8章 基因工程菌的大规模培养及高密度发酵技术
18.1 实验目的
18.2 实验原理
18.3 仪器与试剂
18.4 实验流程
18.5 实验步骤
18.6 结果分析
18.7 注意事项
18.8 应用
第5篇 生物信息学在分子生物学实验中的应用
**9章 核酸和蛋白质序列的查询和分析
19.1 核酸与蛋白质序列的数据库查询
19.2 核酸与蛋白质序列的相似性分析
第20章 常用的分子生物学分析软件
20.1 多序列比对软件
20.2 构建系统发育树软件
20.3 引物设计软件
第6篇 综合性实验
第21章 综合性实验概述
21.1 实验要求
21.2 综合实验报告
21.3 实验目的
21.4 实验安排
21.5 实验材料
21.6 实验流程
21.7 实验步骤
第22章 综合性实验案例
22.1 阿尔茨海默病(Alzlaeimer disease,AD)
22.1 2 katG基因全部缺失和点突变等引起结核菌产生对异烟肼(INH)的耐药研究
22.3 亨延顿舞蹈病(Huntington disease,HD)
22.4 H7N9禽流感病
22.5 神经营养因子(neurotrotrophic factors,NTFs)
附录
附录A 分子生物学实验中的常用数据及换算关系
附录B 分子生物学实验中的常用试剂
附录C 常用细菌培养基和抗生素溶液
附录D 与分子生物学实验相关的实验资料
参考文献