棉花是喜钾作物,对钾的需求很高,但是目前棉花缺钾和因为缺钾而导致的早衰现象,已成为我国棉花生产主要限制因素,迫切需要我们解决这个问题。书中详细阐述当植物受到非生物逆境胁迫如缺钾时,及时补充钾元素或使用调节剂能消除或缓解钾缺乏对植物造成的不利影响。适当补钾可以减少叶片细胞膜损伤和膜脂过氧化程度及叶绿素的降解速度,根系质外体包含蛋白质、代谢物、活性氧(ROS)、抗氧化酶类。在细胞伸长、分裂和分化以及植物抗逆方面有着不可替代的作用。
1 绪论
1.1 钾营养与棉花生长
1.2 激素调节与钾营养
1.3 不同钾营养与冠菌素调节下的叶绿素荧光变化
1.4 质外体汁液提取方法优化
1.5 氧化还原平衡
1.5.1 活性氧的产生
1.5.2 活性氧的作用
1.5.3 活性氧的清除
1.5.3.1 氧化胁迫程度
1.5.3.2 抗氧化物酶
1.5.3.3 非酶抗氧化物含量及非酶抗氧化能力
1.6 代谢组
1.7 蛋白组
1.8 研究目的与意义
2 钾营养与冠菌素对棉花生长的调节
2.1 实验材料与方法
2.1.1 实验材料
2.1.1.1 培养条件
2.1.1.2 幼苗培养及处理设计
2.1.2 实验方法
2.1.2.1 根系形态扫描
2.1.2.2 棉花幼苗根系及叶片鲜重与干重
2.1.2.3 棉花幼苗根系活力
2.2 实验结果与分析
2.2.1 不同钾营养水平及冠菌素调控低钾水平对根系形态生长的影响
2.2.2 不同钾营养水平及冠菌素调控低钾水平对根系及叶片鲜重与干重的影响
2.2.3 不同钾营养水平及冠菌素调控低钾水平对根系活力的影响
2.3 讨论与结论
3 钾营养与冠菌素调节下棉花叶绿素荧光
3.1 实验材料与方法
3.1.1 实验材料
3.1.2 实验方法
3.1.2.1 子叶叶绿素含量测定
3.1.2.2 子叶叶绿素荧光测定
3.2 实验结果与分析
3.2.1 不同钾营养水平及冠菌素调控低钾水平对子叶叶绿素的影响
3.2.2 不同钾营养水平及冠菌素调控低钾水平对子叶叶绿素荧光的影响
3.2.2.1 不同钾营养水平及冠菌素调控低钾水平在黑暗条件下对子叶PSⅡ与PSⅠ叶绿素荧光参数的影响
3.2.2.2 不同钾营养水平及冠菌素调控低钾水平在半饱和光照强度条件下对子叶PSIⅡ与PSⅠ叶绿素荧光拟合参数的影响
3.3 讨论与结论
4 棉花幼苗AWF提取方法建立与优化
4.1 材料与方法
4.1.1 幼苗培养方法
4.1.2 AWF分离方法建立与优化
4.1.2.1 取样方法优化
4.1.2.2 抽真空条件优化
4.1.2.3 离心力和离心时间条件优化
4.2 结果与分析
4.2.1 AWF分离取样方法优化
4.2.1.1 根系AWF分离取样方法优化
4.2.1.2 子叶AWF分离取样方法优化
4.2.2 AWF分离抽真空条件优化
4.2.2.1 样品是否需要抽真空优化
4.2.2.2 需抽真空的真空条件优化
4.2.3 AWF分离离心力和离心时间优化
4.2.3.1 根系AWF分离离心力和离心时间优化
4.2.3.2 子叶AWF分离离心力和离心时间优化
4.3 讨论
4.3.1 AWF分离时取样组织整体性
4.3.2 真空渗透-离心法与直接离心法
5 钾营养与棉花AWF氧化还原平衡
5.1 实验材料与方法
5.1.1 幼苗培养与AWF获得方法
5.1.2 实验方法
5.1.2.1 可溶性蛋白含量和MDH酶活性测定
5.1.2.2 过氧化氢含量测定
5.1.2.3 超氧阴离子含量测定
5.1.2.4 氧化胁迫程度指标测定
5.1.2.5 抗氧化酶活性测定
5.1.2.6 非酶抗氧化物含量和非酶抗氧化能力测定
5.2 结果与分析
5.2.1 AWF和SWF的可溶性蛋白含量之比、MDH酶活性之比
5.2.2 过氧化氢含量
5.2.3 超氧阴离子含量
5.2.4 氧化胁迫程度
5.2.5 抗氧化酶活性
5.2.6 非酶抗氧化物含量和非酶抗氧化能力
5.2.6.1 非酶抗氧化物含量
5.2.6.2 非酶抗氧化能力
5.3 讨论与结论
6 钾营养与棉花AWF代谢组
6.1 实验材料与方法
6.1.1 实验材料
6.1.2 实验方法
6.1.2.1 样品制备
6.1.2.2 色谱质谱采集条件
6.1.2.3 代谢物定性与定量原理
6.2 结果与分析
6.2.1 LK和LKCOR处理根系和子叶AWF代谢组主成分分析
6.2.2 差异代谢物筛选结果
6.2.2.1 初级代谢物
6.2.2.2 次级代谢物
6.2.3 差异代谢物聚类分析
6.2.4 差异代谢物数目统计
6.2.5 KEGG通路富集
6.3 讨论与结论
7 钾营养与棉花AWF蛋白组
7.1 实验材料与方法
7.1.1 实验材料
7.1.2 AWF蛋白组检测方法
7.1.2.1 根系AWF纯化
7.1.2.2 蛋白质提取和肽段酶解
7.1.2.3 LC-MS/MS数据采集
7.1.2.4 蛋白质鉴定和定量分析
7.1.2.5 生物信息学分析
7.2 不同钾营养水平及冠菌素调控低钾水平对根系AWF蛋白组的影响
7.2.1 实验和生物信息学
7.2.2 差异表达蛋白质筛选
7.2.3 差异表达蛋白质聚类分析
7.2.4 差异表达蛋白质GO功能富集分析
7.2.5 差异表达蛋白质KEGG通路富集分析
7.3 讨论与结论
主要参考文献
附表1 LK(0.05mmol·L-1KCl)/HK(2.5mmol·L-1KCI),棉花根系AWF中显著差异代谢物
附表2 LKCOR(0.05mmol·L-1KCl 10nmol·L-1COR)/HK(2.5mmol·L-1KCI),棉花根系AWF中显著差异代谢物
附表3 LKC