本书分为基础实验、综合创新实验两部分。主要内容包括:目的基因的PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳分析;DNA重组、感受态细胞的制备及转化等。
现代分子生物学研究技术已经渗人到生命科学的各个分支学科及医药、农林的各个领域,它的迅速发展正改变着生命科学的面貌,对分子克隆技术的掌握与应用已成为这些学科在新的高度和水平揭示生命现象的共同需求。
本书由长期从事分子生物学教学和科研工作的人员编写。编写组成员在大量分析国内外研究方向及研究热点的基础上,结合在长期教学与科研实践中积累的丰富资料与宝贵经验,设置了思路清晰、实用易懂、层次分明的实验内容。本书具有三个显著特征:一是模块化,主要体现在实验内括基础实验、创新综合型实验,这种架构既适合于本科生的实验指导,也适合于研究生和初学者的科研指导;二是具有地域,本书中所展现的实验方法不括了模式物种的操作方法,还列举了基因组和内容物复杂的环境生物(如嗜盐细菌、荒漠植物、棉花等物种)核酸的分离、分子杂交等技术;三是综合创新型,综合创新型模块的实验内容适合于本科生创新能力的培养,也适合于研究生综合能力的培养,同时可为科研人员学用这些新技术提供指导和参考。
在本书的编写中,王彦芹主要负责教材的结构设置及实验十二、十三的编写及统稿,赵沿海主要负责实验十四、十八的编写,刘逸泠主要负责实验十六、十七的编写,马刘峰、都娟负责实验一的编写,王鹤萌主要负责实验十五、十九的编写,巩慧玲负责实验九的编写慧芳负责实验十的编写,罗晓霞负责实验十一的编写,朱新霞负责实验八的编写,夏占峰负责实验二的编写,白宝伟负责实验三的编写,刘占文负责实验四的编写,应璐负责实验六的编写,邓芳负责实验七的编写,郭媛负责实验五的编写及校稿。
本书得到了专业(生物技术)和塔里木大学专业(应用生物科学)建设项目的资助,在此表示衷心感谢!本书借鉴和参考了多位同行的有关书籍、文献,在此谨向参阅资料的有关作者致以诚挚的谢意!由于时间和水平有限,书中难免存在疏漏和不当之处,敬请不吝指正。
王彦芹,女,1974年10月生,博士,教授,塔里木大学硕士生导师,塔里木大学教学名师,生物技术国家专业负责人。本人从事教育工作17年来,主要承担本科生的《分子生物学》、《基因工程》、《基因工程实验》、研究生的《基因工程原理》、《生物化学与分子生物学技术》等课程的教学工作。科学研究方面从事植物逆境生物学的研究,主要从荒漠植物抗逆性评价、抗逆基因资源的发掘与利用出发,获得了一批抗逆性能基因,并用于棉花的抗逆性生物技术育种的研究。主持完成国家自然科学项目2项,主持并完成塔里木大学校长2项,主持完成华中农业大学作物遗传改良国家实验室开放课题1项,主持兵团“强南”科技创新骨干人才项目1项。发表研究论文30余篇,其中SCI收录5篇;获发明3项,实用新型专利2项;获兵团科步1项,参与出版专著3部。
第一部分基础实验
实验一 目的基因的PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳分析
实验二 DNA重组、感受态细胞的制备及转化
质粒的提取及酶切鉴定
实验四原核表达载体的构建及原核表达蛋白的SDS-PAGE分析…
实验五植物表达载体的构建及转化
实验六真核生物基因组DNA的提取
实验七荒漠植RNA的提取及分析
实验八环境微生物基因组DNA的提取及分析
第二部分综合创新实验
实验九分子杂交分析基因拷贝数及表达水平
实验十环境土壤宏基因组DNA的提取
实验十一微生物基因组文库的构建
实验十二RACE技术克隆荒漠植物基因的cDNA全长
实验十三 Genome Wa技术克隆荒漠植物特异基因的调控序列
实验十四利用CRISPR-Cas9系统验证能
实验十五酵母双杂交技术分析蛋白质互作关系
实验十六原位杂交技术
实验十七蛋白质的分离纯化及双向电泳
实验能基因的亚细胞定位及检测技术
实验十九染色质免疫共沉淀技术